μονοκεφαλίδα-πανό

Εισαγωγή στα κοινά μέσα μικροβιακής καλλιέργειας (I)

Εισαγωγή στα κοινά μέσα μικροβιακής καλλιέργειας (I)

Το μέσο καλλιέργειας είναι ένα είδος μικτής μήτρας θρεπτικών ουσιών που παρασκευάζεται τεχνητά από διάφορες ουσίες σύμφωνα με τις ανάγκες διαφόρων μικροβιακής ανάπτυξης, το οποίο χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια ή τον διαχωρισμό διαφόρων μικροοργανισμών.Επομένως, η μήτρα θρεπτικών ουσιών θα πρέπει να περιέχει θρεπτικά συστατικά (συμπεριλαμβανομένης της πηγής άνθρακα, της πηγής αζώτου, της ενέργειας, του ανόργανου αλατιού, των αυξητικών παραγόντων) και νερό που μπορούν να χρησιμοποιηθούν από μικροοργανισμούς.Ανάλογα με τον τύπο των μικροοργανισμών και τον σκοπό του πειράματος, υπάρχουν διαφορετικοί τύποι και μέθοδοι παρασκευής μέσων καλλιέργειας.

Ορισμένα κοινά μέσα καλλιέργειας στο πείραμα παρουσιάζονται ως εξής:

Θρεπτικό μέσο άγαρ:

Το θρεπτικό μέσο άγαρ χρησιμοποιείται για τον πολλαπλασιασμό και την καλλιέργεια κοινών βακτηρίων, για τον προσδιορισμό του συνολικού αριθμού βακτηρίων, τη διατήρηση των βακτηριακών ειδών και την καθαρή καλλιέργεια.Τα κύρια συστατικά είναι: εκχύλισμα βοείου κρέατος, εκχύλισμα μαγιάς, πεπτόνη, χλωριούχο νάτριο, σκόνη άγαρ, απεσταγμένο νερό.Η πεπτόνη και η σκόνη βοείου κρέατος παρέχουν πηγές αζώτου, βιταμινών, αμινοξέων και άνθρακα, το χλωριούχο νάτριο μπορεί να διατηρήσει ισορροπημένη οσμωτική πίεση και το άγαρ είναι το πηκτικό του μέσου καλλιέργειας.

Το θρεπτικό άγαρ είναι ο βασικότερος τύπος μέσου καλλιέργειας, το οποίο περιέχει τα περισσότερα από τα θρεπτικά συστατικά που απαιτούνται για την ανάπτυξη μικροβίων.Το διατροφικό άγαρ μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη συνήθη βακτηριακή καλλιέργεια.

1

 

Μέσο άγαρ αίματος:

Το μέσο άγαρ αίματος είναι ένα είδος μέσου πεπτόνης εκχυλίσματος βοείου κρέατος που περιέχει απινιδωμένο αίμα ζώων (γενικά αίμα κουνελιού ή αίμα προβάτου).Ως εκ τούτου, εκτός από τα διάφορα θρεπτικά συστατικά που απαιτούνται για την καλλιέργεια βακτηρίων, μπορεί επίσης να παρέχει συνένζυμο (όπως ο παράγοντας V), αίμη (παράγοντας Χ) και άλλους ειδικούς αυξητικούς παράγοντες.Ως εκ τούτου, το μέσο καλλιέργειας αίματος χρησιμοποιείται συχνά για την καλλιέργεια, την απομόνωση και τη διατήρηση ορισμένων παθογόνων μικροοργανισμών που είναι απαιτητικοί για τη διατροφή.

Επιπλέον, το άγαρ αίματος χρησιμοποιείται συνήθως για τη δοκιμή αιμόλυσης.Κατά τη διαδικασία ανάπτυξης, ορισμένα βακτήρια μπορούν να παράγουν αιμολυσίνη για να σπάσουν και να διαλύσουν τα ερυθρά αιμοσφαίρια.Όταν αναπτύσσονται στην πλάκα αίματος, διαφανείς ή ημιδιαφανείς αιμολυτικοί δακτύλιοι μπορούν να παρατηρηθούν γύρω από την αποικία.Η παθογένεια πολλών βακτηρίων σχετίζεται με αιμολυτικά χαρακτηριστικά.Επειδή η αιμολυσίνη που παράγεται από διαφορετικά βακτήρια είναι διαφορετική, η αιμολυτική ικανότητα είναι επίσης διαφορετική και το φαινόμενο αιμόλυσης στην πλάκα αίματος είναι επίσης διαφορετικό.Ως εκ τούτου, το τεστ αιμόλυσης χρησιμοποιείται συχνά για τον εντοπισμό βακτηρίων.

2

 

Μέσο TCBS:

Το TCBS είναι μέσο άγαρ σακχαρόζης χολικού άλατος θειοθειικού κιτρικού άλατος.Για επιλεκτική απομόνωση παθογόνων δονήσεων.Η πεπτόνη και το εκχύλισμα ζύμης χρησιμοποιούνται ως βασικά θρεπτικά συστατικά στο μέσο καλλιέργειας για την παροχή πηγής αζώτου, πηγής άνθρακα, βιταμινών και άλλων αυξητικών παραγόντων που απαιτούνται για την ανάπτυξη βακτηρίων.Η υψηλότερη συγκέντρωση χλωριούχου νατρίου μπορεί να καλύψει τις ανάγκες της αλόφιλης ανάπτυξης του vibrio.Σακχαρόζη ως ζυμώσιμη πηγή άνθρακα.Το κιτρικό νάτριο, το αλκαλικό περιβάλλον υψηλού pH και το θειοθειικό νάτριο αναστέλλουν την ανάπτυξη των εντερικών βακτηρίων.Η σκόνη χολής αγελάδας και το θειοθειικό νάτριο αναστέλλουν κυρίως την ανάπτυξη θετικών κατά Gram βακτηρίων.Επιπλέον, το θειοθειικό νάτριο παρέχει επίσης μια πηγή θείου.Παρουσία κιτρικού σιδήρου, το υδρόθειο μπορεί να ανιχνευθεί από βακτήρια.Εάν υπάρχουν βακτήρια που παράγουν υδρόθειο, θα δημιουργηθεί μαύρο ίζημα στην πλάκα.Οι δείκτες του μέσου TCBS είναι μπλε βρωμοκρεσόλης και μπλε θυμόλης, που είναι δείκτες όξινης βάσης.Το μπλε της βρωμοκρεσόλης είναι ένας δείκτης οξέος-βάσης με εύρος μεταβολής του pH από 3,8 (κίτρινο) έως 5,4 (μπλε-πράσινο).Υπάρχουν δύο περιοχές αποχρωματισμού: (1) το εύρος του οξέος είναι pH 1,2~2,8, αλλάζει από κίτρινο σε κόκκινο.(2) Η περιοχή αλκαλίων είναι pH 8,0~9,6, αλλάζει από κίτρινο σε μπλε.

3

 

Μέσο άγαρ πεπτόνης σόγιας τυριού TSA:

Η σύνθεση του TSA είναι παρόμοια με εκείνη του θρεπτικού άγαρ.Στο εθνικό πρότυπο, χρησιμοποιείται συνήθως για τον έλεγχο των βακτηρίων που καθιζάνουν σε καθαρούς χώρους (περιοχές) της φαρμακευτικής βιομηχανίας.Επιλέξτε το σημείο δοκιμής στην περιοχή που θα δοκιμαστεί, ανοίξτε την πλάκα TSA και τοποθετήστε την στο σημείο δοκιμής.Τα δείγματα λαμβάνονται όταν εκτίθενται στον αέρα για περισσότερα από 30 λεπτά για διαφορετικούς χρόνους και στη συνέχεια καλλιεργούνται για μέτρηση αποικιών.Τα διαφορετικά επίπεδα καθαριότητας απαιτούν διαφορετικούς αριθμούς αποικιών.

4

Άγαρ Mueller Hinton:

Το μέσο MH είναι ένα μικροβιακό μέσο που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση της αντοχής των μικροοργανισμών στα αντιβιοτικά.Είναι ένα μη επιλεκτικό μέσο στο οποίο μπορούν να αναπτυχθούν οι περισσότεροι μικροοργανισμοί.Επιπλέον, το άμυλο στα συστατικά μπορεί να απορροφήσει τις τοξίνες που απελευθερώνονται από τα βακτήρια, επομένως δεν θα επηρεάσει τα αποτελέσματα της αντιβιοτικής λειτουργίας.Η σύνθεση του μέσου ΜΗ είναι σχετικά χαλαρή, γεγονός που ευνοεί τη διάχυση των αντιβιοτικών, έτσι ώστε να μπορεί να εμφανίζει εμφανή ζώνη αναστολής ανάπτυξης.Στη βιομηχανία υγείας της Κίνας, το μέσο MH χρησιμοποιείται επίσης για τη δοκιμή ευαισθησίας στα φάρμακα.Κατά τη διεξαγωγή δοκιμής ευαισθησίας σε φάρμακα για ορισμένα ειδικά βακτήρια, όπως ο Streptococcus pneumoniae, μπορεί να προστεθεί στο μέσο 5% αίμα προβάτου και NAD για την κάλυψη διαφορετικών διατροφικών απαιτήσεων.

5

Άγαρ SS:

Το άγαρ SS χρησιμοποιείται συνήθως για επιλεκτική απομόνωση και καλλιέργεια Salmonella και Shigella.Αναστέλλει τα θετικά κατά Gram βακτήρια, τα περισσότερα κολοβακτηρίδια και τον πρωτέα, αλλά δεν επηρεάζει την ανάπτυξη της σαλμονέλας.Το θειοθειικό νάτριο και ο κιτρικός σίδηρος χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση της παραγωγής υδρόθειου, καθιστώντας το κέντρο της αποικίας μαύρο.Το ουδέτερο κόκκινο είναι ο δείκτης pH.Η αποικία που παράγει οξύ της ζύμωσης ζάχαρης είναι κόκκινη και η αποικία της ζάχαρης που δεν ζυμώνεται είναι άχρωμη.Η σαλμονέλα είναι άχρωμη και διαφανής αποικία με ή χωρίς μαύρο κέντρο και η Shigella είναι άχρωμη και διαφανής αποικία.

6

 

 


Ώρα δημοσίευσης: Ιαν-04-2023